Наименьшая оптовая цена
(без НДС  )
Оптовая партия (ед.) Розничная цена
(без НДС  )
Срок поставки
по запросу   по запросу под заказ

Набор для выявления ДНК хламидии трахоматис ХЛАМИ-ГЕН, ДНК-Технология

Набор для выявления ДНК хламидии трахоматис ХЛАМИ-ГЕН, ДНК-Технология

Набор для выявления ДНК Chlamidia trachomatis ХЛАМИ-ГЕН ДНК-Технология ПЦР-РВ 96 шт. в пробирках 0,2 мл предназначен для выявления ДНК микроорганизма Хламидия трахоматис (Chlamidia trachomatis) в биологическом материале человека методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ, PCR-RT, PCR-Real-time). Формат “Real-time” предназначен для получения результатов ПЦР непосредственно во время амплификации с помощью детектирующих амплификаторов (в режиме реального времени). Регистрационное удостоверение № ФСР 2008/03890 от 29.12.2017

Назначение

С. trachomatis является высоко контагиозной грамотрицательной бактерией с облигатным внутриклеточным паразитизмом. Бактерия чувствительна к ряду антибактериальных препаратов, обладает выраженным таксисом к клеткам цилиндрического эпителия. Набор ХЛАМИ-ГЕН применяется в клинико-диагностической практике в лабораториях медицинских организаций и научно-исследовательских работах для выявления Хламидия трахоматис (C. trachomatis) в соскобах из уретры, цервикального канала, заднего свода влагалища in vitro для обследования и диагностики хламидиоза как этиологической причины заболевания, передающегося половым путем (ЗППП). Обследование может назначать уролог, гинеколог, андролог или репродуктолог при скрининге для выявления бессимптомного носительства или вялотекущих малосимптомных подострых скрытых форм, при наличии активных воспалительных, эрозивных процессов половой сферы, при лечении бесплодия супружеской пары.

С. trachomatis имеет уникальный цикл развития, с двумя формами - неклеточной и внутриклеточной: инфекционные, но метаболически неактивные элементарные тельца и вегетативные неинфекционные ретикулярные тельца. Возможен переход патогена к персистирующей или латентной формам паразитирования, что значительно увеличивает риск развития хронического инфекционно-воспалительного процесса, обусловливает возникновение осложнений, вплоть до нарушения репродуктивной функции [Elwell С., Mirrashidi К., Engel J. Chlamydia cell biology and pathogenesis // Rev Microbiol. — 2016. — Vol. 14. — № 6. — Р. 385–400.]

Состав

Смесь для амплификации - 96 пробирок, запечатанных парафином, по 20 мкл. Прозрачная бесцветная жидкость, под воскообразным белым слоем.

Раствор Taq-полимеразы - 2 пробирки по 500 мкл. Прозрачная бесцветная жидкость.

Минеральное масло - 2 пробирки по 1000 мкл. Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость.

Положительный контрольный образец - 1 пробирка 150 мкл. Прозрачная бесцветная жидкость.

Специфичность

В пробах, содержащих ДНК выявляемого микроорганизма C.trachomatis, во время проведения амплификации, детектирующий амплификатор регистрирует экспоненциальный рост кривой флуоресценции по каналам Fam C.trachomatis (положительные результаты амплификации специфических фрагментов ДНК).

В образцах биологического материала, не содержащих ДНК выявляемого микроорганизма C.trachomatis, при проведении амплификации, регистрируется экспоненциальный рост кривой флуоресценции по каналу Hex (положительный результат амплификации внутреннего контроля (ВКО) и отсутствие экспоненциального роста кривой флуоресценции по каналу Fam (отрицательный результат амплификации специфических фрагментов ДНК).

Аналитическая чувствительность

Аналитическая чувствительность набора зависит от способа выделения нуклеиновых кислот.

Так, при применении набора для выделения ПРОБА-НК чувствительность составит 50 копий/образец, ПРОБА-ГС - 100 копий/образец, ПРОБА-МЧ-РАПИД 300 копий/образец (при элюции в 300 мкл), ПРОБА-РАПИД 500 копий/образец.

Образец при этом должен представлять собой

- соскоб эпителиальных клеток в 500 мкл транспортной среды

- эякулят в 500 мкл транспортной среды

˗ секрет простаты в 500 мкл транспортной среды

˗ моча (при выделении из 1,0 мл образца)

Наиболее распостраненной комбинацией является соскоб эпителиальных клеток в 500 мкл транспортной среды, которая представлена ПРОБА-РАПИД. Это сокращает время пробоподготовки до 20 минут на партию от 40 проб при наличии всего одного термостата марки Гном (производство ДНК-Технология) и центрифуги марки MiniSpin Eppendorf, чувствительность составит 1000 геном-эквивалентмл (500 геном-эквивалент в 500 мкл образца). Для сравнения - стандартная обработка ПРОБА-НК и ПРОБА-ГС составит от сорока минут до полутора часов. Чувствительность при этом с пробоподготовкой ПРОБА-НК составит 100 геном-эквивалентмл, и 200 геном-эквивалентмл с ПРОБА-ГС. Лаборатория может использовать различные формы пробоподготовки в зависимости от поставленных врачом задач. Следует учитывать при выборе метода пробоподготовки, что предел обнаружения ДНК Chlamydia trachomatis в образце зависит от метода выделения и конечного объёма выделенной ДНК (объёма элюции) и составляет 5 копий на аплификационную пробирку.

Специализированное оборудование

Формат Real-time предназначен для детекции результатов ПЦР во время амплификации с помощью детектирующих амплификаторов (в режиме реального времени). Набор адаптирован к детектирующим амплификаторам планшетного типа с 2-мя и более каналами детекции, например, ДТ-322, ДТлайт, ДТпрайм, ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-Технология»), или iCycler iQ и роторного типа, таких как RotorGene Q (Qiagen). Выбрать нужные программы для постановки можно, воспользовавшись инструкцией к набору.

Без учета процесса пробоподготовки время проведения исследования составляет от 1,5 часов.

Количество исследуемых образцов: 96 (включая один положительный и один отрицательный контрольный образец в каждой постановке).

Рекомендуемая транспортная среда для биопроб

Рекомендуется использовать транспортные среды, содержащие консерванты, ПРОБА-РАПИД, ПРОБА-МЧ-РАПИДи аналогичные, прошедшие регистрацию в установленном порядке.

Хранение и транспортировка реагентов

Часть набора храниться и транспортируется при +2-+8 градусах Цельсия, а часть при -20.

Пробоподготовка (заказывать отдельно, не входит в состав набора): ПРОБА-НКПРОБА-ГС, ПРОБА-РАПИД. При выделении ДНК из соскобов из урогенитального тракта мужчин, рекомендуется использовать комплект реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД, а не ПРОБА-РАПИД

Метод

Амплификация синтезированных фрагментов ДНК методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ, PCR-RT); качественный анализ.

Метод основан на процессах амплификации ДНК, заключающейся в повторяющемся физическом воздействии - циклах температурной денатурации ДНК, отжига (присоединении) праймеров с комплементарными последовательностями и последующем синтезе полинуклеотидных цепей, начиная с этих праймеров Taq-полимеразой, используя ДНК в качестве матрицы.

Используемые зонды

Для детекции амплификации в реакционную смесь введены ДНК-зонды. Зонды содержат в себе два компонента в одной молекуле - флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. Реакция образования специфичного продукта разрушает ДНК-зонд, при этом действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, уровень флуоресценции растет согласно концентрации исследуемого фрагмента. Уровень флуоресценции измеряется на каждом цикле амплификации, фактически постоянно проводится ее мониторинг, поэтому реакция названа - ПЦР в режиме реального времени.

В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продукта амплификации ДНК C.trachomatis: включена флуоресцентная метка Fam.

В состав ДНК-зонда, используемого для детекции продукта внутреннего контрольного образца (ВКО), включена флуоресцентная метка Hex.

На основании соотношения значений пороговых циклов, полученных для различных каналов детекции, проводится интерпретация результатов исследования. Пороговые значения для специфического продукта Fam составляют 1,75-2,10, для внутреннего контроля Hex – 2,50.

Вы можете купить набор для выявления ДНК Chlamidia trachomatis ХЛАМИ-ГЕН ДНК-Технология в Москве в нашей компании по наименьшей цене.